Archives de l’Institut Pasteur de Tunis (2006) — Vol.83 (1-4) — https://doi.org/04pwyer06 — voir sur pist.tn
"HSP70 from bacteria to man are known to self-associate to form multiple species suggesting that self-association is related to function. In order to determine the structural basis of HSP70 oligomerization, deletion mutants in the C-terminal domain of HSC70, a constitutive member of the HSP70 family, have been constructed and analyzed for their self-association properties by gel electrophoresis, size-exclusion chromatography and analytical ultracentrifugation. The results of this investigation indicate that, whereas deletion of the GGMP rich C-terminal extremity of HSC70, containing EEVD motif, stabilizes the oligomeric species, deletions of either the aDaE C-terminal helices or the inter-domain hydrophobic linker contribute to the stabilization of the monomeric form. Thus, two non-contiguous regions, located at both ends of the C-terminal domain of the protein, appear to form the contact interface in the oligomers and may interact in a dynamic fashion leading to the formation of several coexis- ting species. "
Keywords: hSC70, oligomerization, mutagenesis, ultracentrifugation, chromatography
Résumé :"Les protéines de choc thermique de 70 kDa (HSP70) sont des chaperons moléculaires qui existent sous la forme d’équilibre thermodyna- mique entre le monomère et plusieurs formes oligomériques. Notre travail porte sur l’identifica- tion des régions impliquées dans la formation de ces oligomères. Dans ce cadre, des versions mutantes de HSC70 altérées dans des interfaces potentiellement responsables de l’oligomérisation ont été préparées. Les protéines purifiées ont été caractérisées du point de vue de leur structure en solution par des approches biochimiques et bio- physiques telles que la chromatographie d’exclusion et l’ultracentrifugation analytique. Les résultats obtenus montrent que les hélices C-terminales et les résidus conservés L391-L394 sont des régions clés dans la régulation de la structure quaternaire des HSP70 puisque la délétion de l’une ou de l’autre conduit à la stabilisation du monomère en solution."